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    血清胱抑素C的檢測及臨床應用
    關鍵字:檢測,AB,CD,EF,yz,wx,st,uv,GH,IJ, 發布時間:2011-08-20

    ?848? 其他原因引起的低血容蕈和低蛋白血癥。輸用前在37℃水浴 中融化,融化時不斷輕輕搖動血漿袋。 冷沉淀 冷沉淀物足FFP在1~5℃條件下分離出的不溶解物再 冷凍后制得,內含有豐富的凝血因子;m管性血友病因子 (VWF)和纖維蛋白原。其主要用于凝血因子,尤其足FVl和 纖維蛋白原缺乏所致出凝血異常患者(血友病、VwD、纖維蛋 白原缺乏癥、尿毒癥性血小板功能紊亂、DIC、手術后滲血)。 400ml。FFP制備的冷沉淀物為1個包裝單位(含80~100 U),容積20~30mL,其中FⅧ>80U,纖維蛋白原(FIB)>150 mg,VWF>60U,血L漿蛋白大于60mg,以及其他各種免疫球 蛋白;一20℃以下(最好一30℃)保存,要求ABO血型同型輸 注。輸用前。37℃水浴中完全融化后。加生理鹽水稀釋,4h內 以患者可耐受的速度盡快輸完,如末融化,提示纖維蛋白原已 轉變為纖維蛋白不能使用。冷沉淀黏度較大,如靜脈推注,最 好在注射器內加入少蜃枸櫞酸鈉溶液,以免注射時發生凝集而 堵塞針頭。 綜卜所述,成分輸ⅡIL不良反應小,既節約資源又便于運輸。 近年來我國的成分輸血_『l;f用廣泛,一般來講,輸注血液和血液 制品不會給患者帶來不適,但有的患者也會在輸注后發生不良 反應,嚴重者可能有死亡危險。因此,要遵循科學、合理用10【的 原則,根據病情需要針對性使用,A‘能有效避免給機體帶來的 損害和影響。專家認為,失血性休克或出血較多的患者需要大 量輸血搶救時,應慎用含有白細胞的血液,且不可在大量出血 時將血液作預防性的輸入。對長期依賴輸血維持牛命的患者 易產牛發熱反應,豐要是由于長期、多次輸血,患者體內產生白 細胞抗體造成的。因此,應濾去除白細胞的成分血,應用時要 注意血液的保存期。庫存血易發生許多代謝和結構的改變,如 果輸注保存時間較長的血液,特別是紅細胞,易產牛微小血塊, 可引起肺栓塞,同時也口r發牛溶血和血尿。總之,要做到科學、 合理用血,臨床醫師要加快知識的更新,了解成分輸血相關知 識。 參考文獻 [1]楊成民,李家增,季陽。等.基礎輸血學[M].北京:中國科 學技術出版社,2001:363. 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(本文責任編輯張耀元收稿n期:2009—12-25) ?綜述? 血清胱抑素C的檢測及臨床應用 孫 萍綜述,郭美琦審校 (天津市第一中心醫院檢驗科300192) 【摘要】血清胱抑素C(CysC)屬于半胱氨酸蛋白酶抑制劑超家族,是1種非糖摹化的堿性低分子蛋白,相對分子質量為 13.559X103,由120個氨基酸組成,是20世紀中期瑞典研究發現的腎小球濾過率((;FR)新指標。CysC基因足“看家基因”,即此 基因在所有組織恒定持續轉錄及表達。CysC在所有有核細胞都町以表達,產生速度十分穩定,不受感染、腫瘤、飲食、體質量及 肝功變化的影響,易通過腎小球濾過屏障。它在體內唯一代謝途徑是通過腎臟排泄,并且在腎小管卜皮細胞內完傘降解,不再重 新回到血液循環中。同時,腎小管也不分泌CysC,血中CysC的濃度主要由GFR決定。因此,CysC有叮能成為較理想的GFR 檢測指標。 【關鍵詞】抑素類;腎功能試驗;腎疾病;腎移植 D()I:10.3969/j.issn.1673—4130.2010.08.034 中圖分類號:R692;R446.61文獻標識碼:A文章編號:1673-4130(2010)08一0848一03 血清胱抑素C(CysC)作為檢測腎功能的1種新的內源性 標志物,近年來受到臨床上的廣泛重視。它與目liif臨床上常用 的反映腎小球濾過率(GFR)的指標,如菊糖清除率、同化素標 志物清除率、內生肌酐清除率(Cer)、血尿素氮(BUN)和血清 肌酐(Scr)等相比具有獨特的優點,更為穩定、可靠、方便。 2004年美國FDA批準將它作為檢測腎功能的指標之一。本 文就CysC的生物學活性、檢測及在臨床中的應用作一綜述。 CysC的生物學活性及檢測 1.CysC的生物學活性CysC屬于半胱氨酸蛋白酶抑 制荊超家族,是1種非糖基化的堿性低分子蛋白,相對分子質 量為13.559×103,由120個氨基酸組成。CysC是20世紀中 期瑞典研究發現的能反映GFR的新指標…。CysC基因足 “看家基兇”,即此基因在所有組織恒定持續轉錄及表達|2l。 CysC在所有有核細胞都町以表達,產生速度十分穩定,不受 萬方數據 換頁 墾喳坌叁匡芏壅查墊!!生!旦蔓!!鲞蔓!塑叢』坐堅墮:壘堅堅墊!!:里些!!!墜! 感染、腫瘤、飲食、體質量及肝功變化的影響,易通過腎小球濾 過屏障。它在體內唯一代謝途徑是通過腎臟排泄,并且在腎小 管卜皮細胞內完全降解,不再重新回到血液循環巾;同時。腎 小管也不分泌CysC,血中CysC的濃度主要由GFR決定,因 此,CysC有可能成為較理想的GFR檢測指標f3l。 2.CysC的檢測CysC的檢測應采用以抗原抗體反應 為理論基礎的各種免疫學檢測方法。包括單向免疫擴散法 (RID)、放射免疫測定法(RIA)、熒光免疫測定法(FIA)、酶聯 免疫吸附法(El。lsA)、顆粒增強透射免疫比濁法(PETIA)、顆 粒增強散射免疫比濁法(PENIA)和溶膠顆粒免疫分析法 (SPlA)。就靈敏度而言,RID最差,EI,ISA、RIA和FIA均較 好,但涉及放射性污染、價格昂貴及測定時間長等,不能實現自 動化,無法滿足臨床大批量標本測定。ELISA、RIA和FIA雖 然靈敏度略差,但能夠實現自動化檢測。滿足臨床需要。CysC 的正常水平主要取決于檢測方法,臨床應注意檢測方法的標 準化。 CysC的臨床應用 1.CysC在腎小管疾病中的應用CysC從腎小球自由 濾過后,被腎小管重吸收,重吸收的CysC幾乎全部在腎小管 分解代謝,僅有極少量從尿中排泄。因此,理論上,若腎小管發 生病變,其分解CysC能/J減弱,尿中排出的CysC勢必會增 加。有學者證實,分別測定52例腎小管疾病患者、47例腎小 球疾病患者和60例健康對照者尿中的CysC,結果顯示,有腎 小管疾病者[4],其尿中CysC濃度明顯升高,與對照組存在顯 著差異,說明CysC濃度在診斷腎小管功能損害方面可能有重 要意義。 2.CysC在糖尿病。腎病中的應用糖尿病腎病(DN)是 糖尿病的豐要并發癥,早期診斷極為霞要。國外有報道,對比 13例1型糖尿病患兒和健康對照組的血糖、血清CysC、Cer 和尿微量清蛋白(mAlb)水平,發現患兒體內CysC水平明顯 高于健康對照組,且病程越長,血糖控制越差,CysC水平越 高,存在最著差異。有血管并發癥(視網膜、腎臟、高血壓)者, 其體內CysC水平明顯高于無并發癥者[5]。Ascic-Buturovie 和Cavaljuga[6]用類似的方法證明,測定血清CysC水平在早 期診斷DN中有重要意義。馬驕[7]認為,聯合尿mAIb、n。一MG 和Bz—MG的檢測對DN的甲.期診斷及其腎功能損害程度的判 斷具有一定價值。但是CysC水平對糖尿病早期腎損壞是否 更有意義,還需要更深入的研究。 3.CysC在急性腎功能衰竭(ARF)中的應用ARF傳 統的診斷方法主要是根據Scr水平,但scr水平受多種因素的 影響,不能精確反映GFR,特別是在輕、中度腎功能損傷。最 近Villa等邱1對50例ICU患者進行研究,入選者均無基礎腎 臟疾病,但有發牛腎衰的高危因素,如血流動力學不穩定、膿毒 癥和應用腎毒性藥物等。通過觀察比較Ser、血清CysC和 GFR,結果顯示,CysC與GFR相關性更好。在25例ARF患 者中,19例mL清CysC濃度升高而Scr升高僅5例,提示在診 斷ARF方面CysC町能比Scr更具價值。但芬蘭學者對202 例危重患者的研究結果顯示,對診斷ARF血清CysC和Scr 濃度問等重要。 4.CysC在腎移植巾應用急、慢性排斥反應免疫抑制 劑治療的毒性或不良反脯是腎移植手術后需要處理的主要問 題。不論何種情況,及早明確腎功能的損傷程度,都是及時采 取干預措施的基礎。目前臨床上常用的Scr指標往往小能準 ?849? 確反映腎移植患者腎功能的惡化情況。White和Akbari|9l測 定ll7例腎移植患者的m清CysC和Scr水平,并以Tc-DTPA 法測得的GFR作為標準,全面比較CysC各種推算GFR的公 式(Filler、LcBricon、Larsson和Hoek公式)和7種基于Scr的 推算公式的利弊。結果發現,基于CysC的Filler和LcBricon 公式具有最低的偏差和最高的精確度。Mendiluce等n1對78 例接受腎移植患者進行了動態監測。分別于腎移植后第2、5、 7、15、30天以及第6、12、18個月測定scr、血清CysC和Ccr水 平。結果發現。腎移植術后前5天,血清CysC水平升高并持 續一段時間,這町能與腎移植術后早期接受大劑晟激素治療有 關,這一時期CysC與Ser及Ccr缺乏相關性。但到移植術后 第18個月,CysC與Ccr相關性良好,認為CysC是評價成人 腎移植患者腎功能的標志物。 5.Cys(:在其他疾病中的應用CysC的檢測不僅儀局 限于腎臟病患者,對其他疾病同樣具有較好的臨床價值。 Koenig等¨叫認為。CysC不僅僅是反映GFR的標志物,并且 在冠心病和心血管病的風險預測上與其他指標互補,尤其在繼 發性心m【管病,CysC水平明顯增加往往提示預后不良、肝硬 化晚期伴GFR下降。因此,在肝病患者中檢測CysC有助于 早期判斷GFR下降。有學者認為,在肝硬化患者中檢測Scr 和Cer不能正確反映(;FR變化,而CysC檢測可以評價GFR。 還有研究表明,60%類風濕關節炎患者CysC明顯增高,Scr僅 5%增高,Ccr有57%明顯下降。因此證明,CysC上升和Ccr 下降明顯相關。 展望 綜上所述,CysC特定的生物特性及功能,使其成為比較 理想的GFR標志物。但目前CysC測定還存在許多不足,臨 床實際應用中還存在一些問題…】,不能排除不同年齡段、性 別、吸煙和C反臆蛋白等因素對CysC水平的影響。另外,Cys C水平受機體一些疾病狀態的影響。如肝病、甲狀腺疾病(甲狀 腺亢進或減退)等。因此,尚不能采用測定CysC來預測 GFR。故不能取代內牛肌酐清除率在常規實驗室的應用,且目 前測定方法屬非均相測定法,很難自動化,無法用于急診。因此 限制了CysC在臨床廣泛應用n“。近年來,顆粒增強透射免 疫比濁法和顆粒增強散射免疫比濁法均町在自動生化分析儀 一卜進行,使CysC廣泛應用于l臨床成為可能,具有廣泛的發展 前景。 參考文獻 [1]MendiluceA,BustananteJ,MartinD,eta1.SerumCysta- tinCasamarkeforrenalfunctioninkidneytransplant patients[J].TransplantProe,2005,37(9):3844. 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(本文責任編輯張耀元收稿日期:2009一11—20) ?綜述? 銅綠假單胞菌耐藥機制的研究進展 何 萍綜述,丁云芳審校 (蘇州大學附屬兒童醫院檢驗科,江蘇蘇州215006) 【摘要】銅綠假單胞菌是1種條件致病菌,在健康人皮膚、呼吸道等部位均町存在。隨著抗生素的廣泛應用,逐漸表現出耐 藥性增強。其耐藥機制主要涉及整合子、金屬蛋白酶的產生和膜微孑L蛋白oprD2缺失、膜外排泵MexAB-OprM、MexEF—OprN以 及銅綠假單胞菌生物被膜等。因此,對銅綠假單胞菌耐藥機制的研究,能為臨床治療銅綠假單胞菌感染提供積極町行的重要 意義。 【關鍵詞】假單胞菌,銅綠;抗藥性,細菌;整合酶;金屬蛋白酶類 DOI:10.3969/j.issn.1673—4130.2010.08.035 中圖分類號:R378.991;R969.3文獻標識碼:A 文章編號:1673—4130(2010)08—0850—02 銅綠假單胞菌(Pa)是1種條件致病菌,在健康人皮膚、呼 吸道等部f誑均可存在。當機體抵抗力降低或皮膚組織損傷時 可引起菌血癥及身體各系統、多部fcc的感染n]。據報道,Pa感 染在院內革蘭陰性蔚感染中居首位,是醫院感染的重要病原 菌。隨著抗牛素的廣泛應用,銅綠假單胞菌的耐藥率不斷上 升。2002年全國細菌耐藥性監測網調查發現,該種菌對臨床 常用藥物的耐藥率為15.2%--78.4%tz]。 整合子在耐藥中的作用 細菌耐藥性主要是細菌的基因突變和外源耐藥基因的獲 得。細菌耐藥基因的獲取主要由整合子和轉座子等遺傳元件 介導,銅綠假單胞菌主要攜帶I類整合子。I類整合子5,保 守級(5,-CS)為編碼整合酶基因(intI1)和啟動子序列;3,保 守級(3,-CS)為季胺類消毒劑外排基因(qacE△1)以及功能不 明的orf5序列。5,一CS和3,-CS之間為可攜帶大量基因的基 因盒,它們可以是p內酰胺酶、金屬酶、氨摹糖苷修飾酶、喹諾 酮靶酶[(DNA促旋酶和(或)拓撲異構酶Ⅳ)]變異等耐藥基因 整合子通過在質粒和轉座子等基因元件卜移動,從而在各菌屬 基因中水平轉移[3“。整合子通過攜帶位點特異性重組系統基 因片段,使整合酶從周圍環境捕獲耐藥基因盒并將其組裝在一 起,形成巨大的耐藥基因多基因座,使細菌具有多重耐藥性,其 在多重耐藥菌的形成及耐藥基因的水平播散中起主要作用【s]。 研究表明,72株intI1基岡檢測陽性的Pa中,多重耐藥 Pa菌6l株(84.7%),高于敏感菌及耐藥菌(8.9%和6.4%, P<O.01),提示多蕈耐藥Pa菌中intI1高分布與多事耐藥 Pa菌相關。類似研究發現,多重耐藥Pa菌中攜有I類整合子 遺傳標志qacEAl一sull[6。7]。 金屬蛩白酶的產生和膜微孔蛋白oprD2缺失 前期眾多研究發現,Pa通過產牛碳青霉烯類酶、金屬8-內 酰胺酶(IMP一1~17、VIM—l~11、SPM、GIM等)、膜微孔蛋白 oprD2缺失和細胞內主動外排泵,對各種常用抗生素產生耐 藥,而金屬口一內酰胺酶耐藥基因通過質粒或整合子在不同細菌 問水平擴散。最近,楊春霞等¨1通過對北京5所教學醫院分離 的213株非重復性啞胺培南耐藥銅綠假單胞菌(IRPA)進行研 究發現,84株有膜微孔蛋白oprD2缺失,其中6株同時產生 IMp-1金屬酶,13株單獨產生IMP-1金屬酶,2株單獨產生 VIM-2金屬酶,而且金屬酶之間有高度同源性。在所有耐藥 菌株中,大部分對美羅培南敏感,只有36株oprD2缺失的菌株 對莢羅培南耐藥,此種情況可能同時存在外排泵機制[9]。 同時,除oprD2缺失引起Pa耐藥外,oprD基因的突變同 樣也是引起Pa耐藥的原因之一。顏英俊等|。0l在近期的研究 中發現,通過對34株耐亞胺培南(IMP)的Pa臨床樣本用PCR 方法擴增oprD基因,并進行DNA分析,結果發現,IMP耐藥 Pa的oprD基因突變率達92.3%。突變方式有點突變、缺失突 變以及插入突變等。從而引起外膜蛋白oprD莖環結構L2、 L3、IMP主要結合位點氨基酸發生替換和移碼突變,導致Pa 對IMP的耐藥。國外也有相同報道,Yoneyama和Nakadl婦發 萬方數據 換頁

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